### 产品名称
英文名：Test Kit for Antibodies to Sheep Foot and Mouth Disease Virus NSP (ELISA)
### 包装规格
96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
### 预期用途
口蹄疫是一种由口蹄疫病毒（FMDV）引起的偶蹄动物急性、高热和高度接触性传染病，主要表现为口腔黏膜、蹄部和乳房皮肤出现水泡和溃疡。本试剂盒用于检测羊血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白（NSP）抗体，可用于口蹄疫的野毒感染筛查及辅助诊断。
### 原理
尊龙凯时提供的这款试剂盒采用酶联免疫法（ELISA）原理，其中包括预包被口蹄疫病毒非结构蛋白的重组抗原酶标板、酶标记物和其它配套试剂。在实验过程中，将对照血清和待检样本添加至酶标板中，经过适当温育后，若样品中含有口蹄疫病毒非结构蛋白抗体，则会与板上抗原结合。随后，通过洗涤去除未结合成分，加入酶标记物，进行特异性结合，最后通过底物液反应生成蓝色产物。显色深浅与样品中的特异性抗体浓度呈正相关。使用终止液后，液体变为黄色，最后在450nm波长下测定各反应孔的吸光值，从而判断样品中是否含有口蹄疫病毒非结构蛋白抗体。
### 试剂盒组成
### 储存及有效期
本试剂盒应储存于2～8℃，有效期为12个月。开封后的包被板需避光存放，并保持在2～8℃，且需防潮，使用期限为2个月。
### 适用仪器
使用包含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，以及可调微量移液器。
### 样品准备
1. 根据常规方法制备动物全血血清，确保血清透明且无溶血、污染。样品在1周内可在2～8℃存放，长期需置于-20℃。
2. 待检血清按10倍稀释（如在稀释板中加入90μl样品稀释液再加10μl血清，混匀）。阴、阳性对照不需稀释。
3. 使用前将浓缩洗涤液恢复至室温，配制20倍的工作洗涤液（如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液）。
### 检验步骤
1. 使用前将试剂盒置于室温30分钟以恢复至室温。
2. 取所需的酶标板条，分别设定阴性/阳性对照各2孔，未用的板条应尽快密封并存放在2～8℃。
3. 向阴、阳性对照孔加入100μl对照液；样品孔每孔加入90μl样品稀释液，再加入10μl稀释后的血清。
4. 混匀后，盖好盖板膜，在37℃避光反应30分钟。
5. 弃去孔内液体，每孔加350μl的工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。
6. 每孔加入100μl酶标记物，盖好盖板膜，在37℃避光反应30分钟。
7. 重复洗涤步骤。
8. 每孔依次加入50μl底物液A和底物液B，混匀，盖好盖板膜，在37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加入50μl终止液，混匀后，在450nm（可用630nm作为参考）测定各孔的吸光值（A值）。
### 参考值
在实验正常的情况下，阴性对照应为≤0.10，阳性对照应为≥0.60。
### 检验结果的解释
1. 样品的A值≥0.38为阳性，A值＜0.38为阴性。
2. 本实验阳性结果需要结合临床和其他检测数据进行综合分析。
### 注意事项
1. 实验操作中需戴手套和工作服，严格执行消毒隔离制度，实验废弃物应按传染物处理。
2. 终止液具有腐蚀性，避免与皮肤和衣物接触，若不慎接触应立即用大量自来水冲洗。
3. 酶标板应在完全恢复至室温后开启，未用完的板条需放入干燥剂的密封袋中保存。
4. 使用浓缩洗涤液时需注意，低温时容易结晶，使用前应恢复至室温。
5. 洗涤时各孔需确保加满液体，以防孔口有游离酶无法清洗干净。
6. 检测用样品需保持新鲜。
7. 检验结果的判定应以酶标仪的读数为准。
8. 不同批号的试剂成分不得混用。