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细胞复苏状态不佳,尊龙凯时如何调整?

发布时间:2025-02-15 发布人:尊龙凯时编辑

细胞复苏后状态不佳,该如何进行调整?以下是细胞复苏后状态差的原因及其解决方法,您可以根据具体情况及时进行调整。

细胞复苏状态不佳,尊龙凯时如何调整?

1. 细胞冻存不当

尊龙凯时建议可以尝试调整细胞状态,增加血清的比例,后续再继续传代以改善细胞状态。

2. 自行制备的冻存细胞无活性

制备冻存细胞时,建议使用传代次数少且处于对数期的细胞。提高冻存密度有助于提升复苏存活率,推荐密度为100~300万细胞/mL。

3. 细胞复苏方法不当

复苏时讲究“快融”,越快融化,细胞所受损伤就越小。确保冷冻细胞解冻迅速,接种前使用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。

4. 复苏培养基使用不当

确保培养基使用前已经预热,并尽快移除含有冷冻保护剂的培养基,以防止细胞活力下降。

5. 处理细胞时动作不够轻柔

冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影响。尽量避免通过涡旋振荡或用力敲打培养瓶(除了培养昆虫细胞)来使细胞脱落,也请避免高速离心细胞。

6. 细胞稀释过度

建议将解冻后的细胞高密度接种,以改善复苏效果,从而提升细胞活率。

7. 冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光

如果冻存保护剂未避光储存,可能会转变为对细胞有毒的物质。因此,建议重新取一只冻结保护剂,以便重新冻存细胞。

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