细胞复苏后状态不佳,该如何进行调整?以下是细胞复苏后状态差的原因及其解决方法,您可以根据具体情况及时进行调整。
尊龙凯时建议可以尝试调整细胞状态,增加血清的比例,后续再继续传代以改善细胞状态。
制备冻存细胞时,建议使用传代次数少且处于对数期的细胞。提高冻存密度有助于提升复苏存活率,推荐密度为100~300万细胞/mL。
复苏时讲究“快融”,越快融化,细胞所受损伤就越小。确保冷冻细胞解冻迅速,接种前使用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。
确保培养基使用前已经预热,并尽快移除含有冷冻保护剂的培养基,以防止细胞活力下降。
冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影响。尽量避免通过涡旋振荡或用力敲打培养瓶(除了培养昆虫细胞)来使细胞脱落,也请避免高速离心细胞。
建议将解冻后的细胞高密度接种,以改善复苏效果,从而提升细胞活率。
如果冻存保护剂未避光储存,可能会转变为对细胞有毒的物质。因此,建议重新取一只冻结保护剂,以便重新冻存细胞。
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