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尊龙凯时基质胶的应用指南

发布时间:2025-02-08 发布人:尊龙凯时编辑

尊龙凯时的Matrigel基质在使用过程中可能会出现色差变化,从淡黄色到深红色。这一现象是由酚红和碳酸氢盐与CO2的反应造成的,但在5% CO2的环境下,色差会显著减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶,可以使Matrigel分散更加均匀。所有操作必须在无菌条件下进行,试剂瓶的瓶盖可以使用70%乙醇擦拭后自然干燥。为了确保Matrigel呈现出均匀的胶状,使用预冷的移液器是必不可少的。

尊龙凯时基质胶的应用指南

细胞可以在0.5mm厚的Matrigel基质层表面生长,也可以在1mm厚的Matrigel三维基质内部生长。需要注意的是,过度稀释的Matrigel会导致形成非胶质的蛋白层,这种层可以支持细胞贴壁,但不适用于细胞的分化研究。同时,冻融后的Matrigel可分装于多个小管中,所有的小管均需使用预冷的冻存管,并迅速冷冻以保存,避免多次冻融造成的影响。

在22-35°C的环境下,Matrigel将迅速成胶,因此在溶解时,建议在4°C的冰浴中过夜冻融(在4°C时,随着温度的上升,Matrigel可能会部分成胶)。所有操作用品使用前需放置在冰浴中,确保使用预冷的移液管、吸头和小管来处理Matrigel。成胶后的Matrigel可在24-48小时后再次呈现液态。

为了增强Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性,稀释浓度不应低于1:3,无血清培养基可以用于稀释,Matrigel成胶后需立即使用。以下是不同厚度Matrigel的成胶与包被方法:

薄胶成胶方法

1. 冻融后,使用预冷的移液枪头将Matrigel基质混匀至均匀状态。
2. 准备需使用的培养板,放置于冰上,加入浓度为50μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
3. 在37°C下放置30分钟,即可使用。

厚胶成胶方法

1. 冻融后,使用预冷的移液枪头将Matrigel基质混匀成均匀状态。
2. 将需使用的培养板放置于冰浴中,将细胞与Matrigel基质混合,用移液枪头悬浮于基质中,并加入150-200μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
3. 在37°C下放置30分钟,即可成胶。此方法可用于细胞培养基质,也可支持细胞直接生长在胶表面。

薄层包被方法

1. 冻融后,使用预冷的移液枪头将Matrigel基质混匀成均匀状态。
2. 根据实际使用需求,使用无血清培养基稀释Matrigel基质,以确定最佳包被浓度。
3. 将稀释后的Matrigel基质包被于目标培养器皿中,包被量应至少覆盖整个生长表面。室温下孵育1小时即可。